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Collaboration
Laboratoire d'Ecologie Microbienne de la
Rhizosphère (LEMIR)
UMR 6191, CNRS-CEA-Université de la Méditerranée
DEVM, CEA Cadarache
Saint Paul Lez Durance, France
Institut de Génétique et Microbiologie
Université Paris-Sud
Orsay, France
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Pour la plupart des
organismes vivants, quelques cassures double-brins de l'ADN induites
par des radiations ionisantes sont létales. Toutefois, les bactéries
appartenant au genre Deinococcus sont connues pour être très
tolérantes au rayonnement ionisant. Cette tolérance est en grande
partie liée à la capacité à réparer efficacement de nombreuses (des
centaines) cassures de l'ADN. Il est à noter que de fortes doses de
radiation gamma, nécessaires pour générer de très nombreuses cassures
de l'ADN, n'existent pas naturellement sur Terre, suggérant que la
résistance au rayonnement ionisant est liée à la réponse des bactéries
à des conditions naturelles qui peuvent endommager l'ADN comme la
dessiccation. Effectivement, les bactéries du genre
Deinococcus présentent non seulement une résistance
exceptionnelle au rayonnement gamma mais également à la dessiccation
ainsi qu'aux rayons ultraviolets.
Deinococcus radiodurans R1
Parmi les différentes espèces de Deinococcus décrites jusqu'à
présent, seule Deinococcus radiodurans souche R1 a largement
été étudiée. L'irradiation gamma à de fortes doses, ainsi qu'une
longue période de dessiccation, génèrent de très nombreuses cassures
double-brins du génome de D. radiodurans. Il a été montré que
D. radiodurans est toutefois capable de réparer ces cassures
induites par l'irradiation gamma en quelques heures, en milieu
riche. Le génome de D. radiodurans R1 a été entièrement
séquencé et analysé (Makarova et al., 2001, Microbiol Mol Biol Rev 65
: 44), et les effets d'une exposition au rayonnement gamma sur le
transcriptome et le protéome ont été mesurés, mettant en évidence une
modulation de l'expression de nombreux gènes. Sur la base des
connaissances actuelles, trois hypothèses peuvent être proposées pour
expliquer sa radio-tolérance :
- D. radiodurans utilise des mécanismes de réparation
conventionnels, mais avec beaucoup plus d'efficacité que les
autres bactéries ;
- de nouvelles fonctions de réparation pourraient être
associées aux protéines hypothétiques ayant pour l'instant des
fonctions inconnues ;
- l'ADN est présent sous forme d'une structure condensée qui
limite la dispersion des fragments générés par l'irradiation, ce qui
pourrait faciliter la réparation.
Malgré ces hypothèses, les mécanismes de réparation du génome de
D. radiodurans, et donc l'extrême radio-tolérance, ne sont
toujours pas élucidés (Cox & Battista, 2005, Nat Rev Microbiol 3 :
882).
Deinococcus deserti VCD115
Une analyse de génomique comparative de D. radiodurans avec
une autre espèce de Deinococcus devrait permettre une
meilleure compréhension des mécanismes de radio-tolérance.
Pour cette étude, Deinococcus deserti souche VCD115 a été
sélectionnée. Cette bactérie, récemment isolée du désert du Sahara, ne
pousse pas en milieu riche contrairement à D. radiodurans (de
Groot et al., 2005, Int J Syst Evol Microbiol 55 : 2441). Les cellules
de D. deserti se présentent sous forme de bâtonnets non
mobiles, alors que celles de D. radiodurans sont
sphériques. Contrairement aux colonies roses ou rouges formées par les
autres espèces de Deinococcus, celles formées par
D. deserti sont blanchâtres. D. deserti présente un
comportement de type Gram négatif, alors que D. radiodurans
présente un comportement de type Gram positif. La taille du génome de
D. deserti VCD115 a été estimée à 3,8 Mb, alors que celle de
D. radiodurans est de 3,2 Mb.
Nous avons montré que la souche D. deserti VCD115 est très
tolérante aux rayonnements gamma et UV, et à la dessiccation (de Groot
et al., soumis). L'exposition de D. deserti à une forte dose
de rayonnement gamma génère la fragmentation de son génome (cassures
double-brins de l'ADN), mais D. deserti a la capacité de le
réparer en quelques heures en milieu pauvre.
 Résistance aux rayonnements gamma et UV |
Le séquençage du génome de D. deserti VCD115
Pour mieux comprendre l'extrême radio-tolérance chez
Deinococcus, D. deserti sera comparée à
D. radiodurans d'abord à l'aide de l'approche génomique, puis
d'autres approches globales (transcriptomique, protéomique) et ciblées
(génétiques, biochimiques, structurales). Pour cette étude
comparative, le génome de D. deserti souche VCD115 est en
cours de séquençage. La séquence du génome de D. deserti
permettra de mettre en évidence:
- à la fois les points communs entre les deux génomes
(D. deserti VCD115 vs D. radiodurans R1),
- les différences avec des génomes complets de bactéries
radio-sensibles,
- et les gènes uniques de VCD115.
La connaissance des génomes complets de D. radiodurans R1 et
de D. deserti VCD115 permettra de hiérarchiser les gènes
selon leur importance et/ou leur originalité dans la tolérance aux
différents stress endommageant l'ADN. L'analyse comparative et
fonctionnelle devrait nous permettre d'améliorer notre compréhension
des mécanismes impliqués dans la réparation de l'ADN et la résistance
extraordinaire aux rayonnements gamma, UV et à la dessiccation.
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